Expresión en bacteriófagos y producción de anticuerpos monodominio recombinantes

Diseño del antígeno
e inmunización del camélido

• Proteínas nativas o recombinantes, haptenos bioconjugados o derivatizados.
• Inmunización.
• Extracción de linfocitos circulantes (PBMC).
• Construcción de una biblioteca ADNc.

Construcción de una genoteca
de expresión en bacteriófagos

• Construcción de bacteriófagos portadores de V_HHs totales.
• Selección de los bacteriófagos específicos contra el antígeno (panning).

Análisis sistemático de la genoteca
de expresión en bacteriófagos

• Evaluación de la afinidad/especificidad por el antígeno de los fagos seleccionados.
• Secuencia aminoacídica de los anticuerpos recombinantes monodominio candidatos.

Maduración de la afinidad e ingeniería para funcionalización

Producción
en pequeña escala

• Expresión del anticuerpo monodominio recombinante libre de bacteriófago en E. coli.